4-нитрофенил бета-D-галактопиранозид CAS: 200422-18-0

Effect: ONPG атайын энзим β-galactosidase катышуусун жана ишин аныктоо үчүн колдонулган субстрат болуп саналат.β-галактозидаза ферменти бар жана активдүү болгондо, ал ONPGди эки продуктуга бөлөт: о-нитрофенол жана галактоза туунду.О-нитрофенолдун бөлүнүп чыгышы сары түстүн өзгөрүшүнө алып келет, аны спектрофотометрдин жардамы менен өлчөөгө болот.

Колдонмо: ONPG молекулярдык биология жана биохимия изилдөө бир нече колдонмолорго ээ:

β-галактосидаза активдүүлүгүн аныктоо: ONPG адатта β-галактозидаза ферментинин активдүүлүгүн өлчөө жана сандык аныктоо үчүн колдонулат.Ферменттин активдүүлүгүнө түз пропорционалдуу о-нитрофенолдун пайда болуу ылдамдыгын спектрофотометрдик ыкма менен өлчөөгө болот.

Ген экспрессиясы жана жөнгө салуу: ONPG көбүнчө ген экспрессиясын жана жөнгө салуу изилдөөлөрүнө байланыштуу эксперименттерде колдонулат.Ал көп учурда белгилүү промоутерлордун көзөмөлү астында гендердин экспрессиясын изилдөө үчүн кеңири колдонулган lacZ синтез системасы сыяктуу синтездик протеин анализдеринде колдонулат.ONPG аркылуу өлчөнгөн бета-галактозидаза активдүүлүгү гендин экспрессиясынын деңгээлине түшүнүк берет.

β-галактозидаза активдүүлүгүнө скрининг: ONPG рекомбинантты ДНК технологиясында β-галактозидазаны коддогон LacZ генинин болушун жана иштешин аныктоо үчүн колориметрдик скрининг ыкмасы катары колдонулушу мүмкүн.Бул скрининг ыкмасы кызыккан генди камтыган клондорду аныктоого жардам берет.

Ферменттердин кинетикасын изилдөө: ONPG β-галактосидаза ферментинин кинетикасын изилдөөдө да пайдалуу.Ар кандай субстрат концентрациясында фермент-субстрат реакциясынын ылдамдыгын өлчөө аркылуу Михаэлис-Ментен константалары (Км) жана реакциянын максималдуу ылдамдыгы (Vmax) сыяктуу кинетикалык параметрлерди аныктоого болот.